基质喷涂加高压电的重要性
基质粒径与MALDI MS检测灵敏度之间的关系
脑组织微区具有特异性。利用MALDI MSI观察微区脂质等代谢小分子分布。
采用Matrix Builder基质喷涂仪,DHB基质(20 mg/mL DHB,溶剂:乙腈/水=8/2),布鲁克MALDI-FTICR MSI质谱进行实验。
具体参数如下:
(1)基质喷涂仪实验参数如下:循环次数为8次;泵速为0.07 mL/min;扫描间距为2 mm;喷嘴温度为 50℃;喷雾压力为0.55 MPa;干燥时间为8 s;喷雾电压为 0 V;基质浓度为20mg/mL;喷嘴速度为 30 mm/s;扫描方式为横向扫描;载波台温度为45℃;保持时间为30 s;喷嘴高度为12 mm。
(2)MALDI-FTICR质谱分析采用Bruker SolariX质谱仪。使用NaTFA对实验仪器进行外部校标。具体的实验参数如下:Plate offset为100 V;Deflector Plate为180 V;Laser Shots为150 V;Laser Power为65%;Frequency为150 Hz;Laser Focus为medium;步长为100 µm。数据处理使用FlexImaging 5.0软件(Bruker Daltonics)
图1:质谱数据图。由图可见,大量的脂质分子可以被检测到。
图2:分子成像图,脑微区分子分布有清晰界限
采用Matrix Builder基质喷涂仪,DHB基质,布鲁克MALDI-FTICR MSI质谱进行实验。
采用Matrix Builder基质喷涂仪,DHB基质(20 mg/mL DHB,溶剂:乙腈/水=8/2),布鲁克MALDI-FTICR MSI质谱进行实验。
具体参数如下:
(1)基质喷涂仪实验参数如下:循环次数为8次;泵速为0.07 mL/min;扫描间距为2 mm;喷嘴温度为 50℃;喷雾压力为0.55 MPa;干燥时间为8 s;喷雾电压为 0 V;基质浓度为20mg/mL;喷嘴速度为 30 mm/s;扫描方式为横向扫描;载波台温度为45℃;保持时间为30 s;喷嘴高度为12 mm。
(2)MALDI-FTICR质谱分析采用Bruker SolariX质谱仪。使用NaTFA对实验仪器进行外部校标。具体的实验参数如下:Plate offset为100 V;Deflector Plate为180 V;Laser Shots为150 V;Laser Power为65%;Frequency为150 Hz;Laser Focus为medium;步长为100 µm。数据处理使用FlexImaging 5.0软件(Bruker Daltonics)
图3 质谱数据图
图4 部分脂质分子成像图
采用Matrix Builder基质喷涂仪,纳米颗粒TiO2基质(100nm,10 mg/mL DHB,溶剂:乙腈/水=8/2),布鲁克MALDI-FTICR MSI质谱进行实验。
具体参数如下:
TiO2基质2mg/mL溶于甲醇溶液基质喷涂仪实验参数如下:循环次数为20次;泵速为0.08 mL/min;扫描间距为2 mm;喷嘴温度为 50℃;喷雾压力为0.6 MPa;干燥时间为8 s;喷雾电压为 0 V;基质浓度为2mg/mL;喷嘴速度为 30 mm/s;扫描方式为横向扫描;载波台温度为45℃;保持时间为30 s;喷嘴高度为12 mm。
图5 TiO2对鼠脑解析的总离子流图
图6 TiO2对鼠脑解析的分子成像图
(1)Anal. Chem. 2015, 87, 12, 5860–5865
(2)维科托基质喷涂应用支撑实验室。